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足彩6场半全场玩法:VRB-MUG瓊脂培養基的實驗原理及方法

楊永帥
錄入時間:2019-4-30 11:28:52 來源:青島海博生物

6场半全场开奖总汇 www.eknyoa.com.cn 一、實驗原理:

  用于食品中大腸桿菌的平板計數,其中蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可發酵的糖類;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;膽鹽和結晶紫抑制革蘭氏陽性菌,特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌;中性紅為pH指示劑;瓊脂為凝固劑;大腸埃希氏桿菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

二、試驗方法:

  稱取本品41.6g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸2分鐘。冷卻至45-50℃左右時,備用。無需高壓滅菌。

  1、制備質控菌液。

  2、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液1ml,接種到兩個無菌平皿中,將10ml-15ml冷至45±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)傾注于每個平皿中。小心旋轉平皿,將培養基和目標菌質控菌液充分混勻。待瓊脂凝固后,再加入3ml-4ml的VRB-MUG瓊脂覆蓋平板表層。

  3、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次,去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

  4、36±1℃倒置培養基培養18-24小時,記錄實驗結果。

三、結果判定:接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養18-24小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

生長情況

回收率

其他特征

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

/

G≤1

/

/

大腸埃希氏菌

ATCC25922

20-200

+++

≥70%

紫紅色菌落,有熒光

產氣腸桿菌

ATCC13048

20-200

+++

≥70%

紫紅色菌落,無熒光

弗氏檸檬酸鹽桿菌

ATCC43864

20-200

+++

≥70%

紫紅色菌落,無熒光


圖1-2  VRB-MUG瓊脂微生物質控結果

備注:A:正常情況下拍攝,B:366nm紫外燈下拍攝;

a:金黃色葡萄球菌,b:大腸埃希氏菌,c:產氣腸桿菌,d:弗氏檸檬酸鹽桿菌

 

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